




使用缓冲溶液的注意事项:不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加**,具有简便准确误差恒定的特点,特别是在做成批样品时更显出它的优越性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,tris生物缓冲剂哪家价格低?,因该器皿不密闭,易造成氨的挥发(醋酸-缓冲液中的醋酸也同理),从而,导致溶液失效,正确的做法是缓冲液应适量配制,使用后及时密闭并置于低温中保存。
三羟Tris是生**学领域应用很广泛的一种缓冲剂,cas号77-86-1,具有性质稳定不参与生化过程、缓冲能力强等优点,被广泛用于蛋白质和核酸相关的检验。由于Tris的用量很大很广泛,一些细节也需要注意,Tris缓冲液虽然缓冲能力强,但稀释过大或者反应体系体积变化大的时候,需要慎重使用Tris,稀释十倍的话篇pH变化大于0.1,磷酸盐缓冲液则pH变化小于0.1。
一旦确定了缓冲液的pH值,就需要选择使用什么样的缓冲体系。首先是在选择缓冲体系时要确保选择的缓冲体系在你设定的pH值上确实具有缓冲能力。选择的缓冲体系,其解离常数pKa值应该在设定的pH上下一个pH值单位内。
再者是确保你使用的缓冲液浓度足够高以达到实际缓冲溶液的作用,正常一般选择的浓度是20~100mM。需要记住的是你所使用的缓冲体系不应该影响蛋白活性!例如,磷酸盐会**激酶的活性,所以反应前应彻底地透析掉。
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