




TBST缓冲液 TBST中含有Tris-HCl,N***,tween20这三种物质,是做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质,并且维持一个接近的天然环境。其中,Tween是一种离子表面活性剂,可加速非特异性结合的分离。因为Western Blotting中所用的膜可以与蛋白质结合,孵育过程中,能够与膜非特异性结合。为了防止以后**造成胶片背景太高,在孵育后,混有Tween 20的TBS 能够将非特异性结合的洗掉,增加特异性。
Tris配置缓冲液时需要搭配酸一起使用,不仅是搭配盐酸使用,还可以组合成其它缓冲体系,比如Tris-磷酸,Tris-硼酸、Tris-醋酸、Tris-甘氨酸等。使用起来比较自由,应用也要更为广泛一些。常用浓度有0.1mol/L,0.05mol/L。Tris盐酸盐粉末**,pH通常是固定的,使用时直接溶于去离子水即可,操作很方便,一步到位,节省时间。Tris的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间,粉末**可以混合Tris粉末使pH调节到近中性。盐酸常温下是液体,而且易挥发,储存和运输不如粉末**方便。
Tris中文全称三羟,CAS77-86-1,是重要的生物缓冲剂和酸量滴定法基准物质,有着极其广泛的社会使用性。三羟:它可以和***一起作用,但在有些系统中也起**作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris缓冲液,生物缓冲剂哪家服务好?,4℃时是8.4,37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想。
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