




此外,回收时也缓冲系统进行电泳。但是,TAE的缺点是缓冲容量小,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换,否则长时间电泳是不可选用的。TBE缓冲液 酰胺实验以及琼脂糖凝胶电泳将调节pH值的酸溶液换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。TBE Buffer是分子实验中常用的缓冲液,由Tris和硼酸、EDTA组成,所以简称为TBE buffer。
一旦确定了缓冲液的pH值,tris缓冲液哪家靠谱?,就需要选择使用什么样的缓冲体系。首先是在选择缓冲体系时要确保选择的缓冲体系在你设定的pH值上确实具有缓冲能力。选择的缓冲体系,其解离常数pKa值应该在设定的pH上下一个pH值单位内。
再者是确保你使用的缓冲液浓度足够高以达到实际缓冲溶液的作用,正常一般选择的浓度是20~100mM。需要记住的是你所使用的缓冲体系不应该影响蛋白活性!例如,磷酸盐会**激酶的活性,所以反应前应彻底地透析掉。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的**钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)
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