




武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、**、细胞等生物实验。
CaNZ是CaN(Calcineurin)**的正义表达**,是在真核生物中存在的一个Ca2+及CaM依赖的Ser/Thr蛋白磷酸酶,它包括一个催化亚基calcineurin A和一个Ca2+结合亚基calcineurin B,其催化亚基calcineurin A活性受CaM调节。本实验在筛选再生体系基础上,利用带有信号肽和CaM结合肽的载体,以农为媒介将CaN**导入中,预期过表达的融合蛋白将会被分泌到细胞外并与质外体CaM相结合,**质外体CaM的功能,从而构建出质外体CaM的反义植株,观察质外体CaM反义植株的表型改变,为进一步开展CaM在植物生长发育过程中的功能研究提供基础。 研究结果如下: (1)以14-16d叶片为外植体,以MS为基本培养基,通过附加配方对比,筛选出适合材料再生的培养基配方:MS+IAA 0.5mg·L-1+6-BA 1.5mg·L-1为芽分化的培养基,亚细胞**哪家**,1/2MS+NAA0.1mg·L-1为生根培养基。 (2)用Kan进行叶片抗性筛选。当Kan浓度小于50mg·L-1时,叶片能正常分化出芽;当Kan浓度为75mg·L-1时,叶片大多数白化;当Kan浓度超过100mg·L-1时,芽分化停止。所以,以Kan浓度100mg·L-1为叶片分化芽抗性筛选的临界浓度;而培养物根对较为敏感,Kan 50mg·L-1为筛选临界值。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、**、细胞等生物实验。
大豆是重要的油料作物和植物蛋白质资源,在食品工业和农业生产中占有重要地位。大豆花叶病毒病分布非常广泛,是一种世界害,它严重影响大豆产量和外观品质。目前主要通过适当改变播种时期、选用抗病品种、防蚜等措施来降低大豆花叶病毒(***V)对大豆产量的影响,国内外从遗传工程角度来探索抗***V途径的还很少。类甜味蛋白(Thaumatin-like proteins,TLP)是第5类植物病程相关蛋白,在离体条件下具有很强的抑菌活性。以往关于类甜味蛋白的抗病研究都限于抗**,本研究探讨了其与花叶病毒抗性之间的相关性。GmTLP是本研究从大豆品种科丰1号中利用***V诱导的双向电泳技术分离的类甜味蛋白编码**,在大豆中存在两个拷贝,分别命名为GmTLP1和GmTLP2。本文对GmTLP1在植物中的表达及功能进行了初步研究。研究结果如下:1实时荧光定量PCR结果显示,在***V诱导4h、8h、24h、48h时,GmTLP1**在转录水平上的表达量明显上升,说明在mRNA水平上该**是响应***V诱导的,并且响应模式为双峰模式。 2半定量RT-PCR结果显示,GmTLP1在大豆根、茎、叶、荚中均有表达,只是荚中表达量相对低一些。3构建绿色荧光蛋白融合表达载体,利用根*农法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达。
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综述了根*农介导的遗传转化近几年获得的新进展在转化机理方面,对农自身转录与调控的研究已相当深入,而对有关的植物编码因子的研究也已取得了实质性进展;在转化范围上,对**与裸子植物的转化取得了不少进展,单子叶植物尤其是一些有重要经济价值的禾谷类作物应用农介导相继获得了转化植株;在转化方法方面,发展了新的简单有效的整体植株法,并将T-DNA转移和整合原理结合到**枪等DNA直接转移方法上;**人工染色体与农的联合应用赋予了其大片段DNA转化的功能.针对上述领域,指出了其中仍然存在的一些问题并提出了一些构想.
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