




三羟Tris是一种有机化合物,三羟甲基**安全有效,其CAS77-88-1,分子式为(HOCH2)3CNH2。作为一种常见的生物缓冲剂,上海三羟甲基**,三羟Tris不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一,还可生产多种化工、、产品,是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些的重要中间物。此外还可以用于制备复合相变材料。相变材料是指随温度变化而改变物质状态并能提供潜热的物质。当物理状态发生变化时,材料自身的温度在相变完成前几乎维持不变,形成一个宽的温度平台,三羟甲基**安全生产,但吸收或释放的潜热却相当大。
许多缓冲液中含有N***,以帮助保持蛋白的可溶性和模拟生理条件。一般常用150 mM的N***。
在不同的蛋白纯化步骤中,三羟甲基**使用安全,可能需要改变盐离子的浓度。例如,如果是通过离子交换层析进行蛋白纯化,一开始需要降低盐离子的浓度(5~25mM)避免高离子强度和蛋白竞争和填料结合,这样可防止蛋白从离子交换柱中流穿,从而使柱子能够结合目的蛋白,洗脱除去杂蛋白。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的**钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)
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