取材与标本固定
1． 取材 对于原位杂交所用的材料要尽可能新鲜，为了防止RNA的降解，取材要迅速，取材后要尽快固定或冷冻保存。
2．固定 进行原位杂交的**或细胞必须经过固定处理，固定的目的是为了①保持细胞形态原有结构；②保存细胞内的DNA或RNA的水平；③使探针易于进入细胞或**内。
3．固定液 常用固定液有10％甲醛、4％多聚甲醛、冰醋酸-酒精混合液、Bouin氏固定液等。这些固定液都有不同的优缺点因此要根据具体的实验对象，选择的固定液。
4．固定方法 **标本取材后，迅速放入固定液中2～4h，取材**大小为1cm×1cm×0.5cm，不宜太大。必要时，动物**可进行灌流固定，然后将**按要求取材放入20%蔗糖中，4℃过夜，原位杂交检测，次日可行冰冻切片。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、**、细胞等生物实验。
自身对照用同一**切片或涂片上与靶序列无关的其他结构作对照。阳性与阴性结构同在一个视野中，相互印证，这本身就是对阳性反应的特异性对照。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、**、细胞等生物实验。
探针的标记物可以是性同位素，也可以是非性生物素和半抗原等，性同位素中，3H和35S为常用，3H标记的探针半衰期长，成像分辨率高，便于**，缺点是能量低，35S标记探针活性较高，影像分辨率也较好，而32P能量过高，致使产生的影像模糊，不利于确定杂交位点。
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