提到缓冲液就不得不延伸一下,这就是Henderson-Hasselbalch方程。
在前面提到,
将等式同时取对数,并简化就可以得到:
或者
这就是Henderson-Hasselbalch方程。
注意:式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度,除了酸性过于强的情况下,由于同离子效应的存在,碱性三羟甲基****缓冲液报价,一般都可用此式计算。
Tris本身呈碱性,只用Tris-HCl缓冲体系即可配制pH范围由酸性到碱性的缓冲液,方法也较为简单,而且还可以与其他物质组成多种缓冲体系;对生**学过程干扰很小,聊城三羟甲基****缓冲液报价,也不与钙、镁离子及***离子发生沉淀。但是,Tris缓冲液的pH值受溶液浓度和温度影响较大,稀释十倍,缓冲液的pH值变化大于0.1,现货三羟甲基****缓冲液报价,温度每升高一度,pH值下降0.03;同时其易吸收空气中的CO2,高纯度三羟甲基****缓冲液报价,所以配制的缓冲液要盖严密封。
蛋白制备及纯化过程中缓冲液的选择非常重要,合适缓冲液才能保证蛋白的活性和结构稳定。
当我们纯化蛋白时,的就是要保持蛋白在纯化过程中不能失活,或者是尽量降低纯化过程对蛋白活性带来的损失。这就意味着蛋白在整个纯化过程中要始终保持可溶性和活性。
因此设计一个防止蛋解和聚合的蛋白纯化缓冲体系就非常重要了,尤其会凸显在实验结果上。在设计缓冲buffer时应考虑以下几个因素:pH值、缓冲体系、盐离子、还原剂和稳定剂。其中每一个因素都要根据你的目的蛋白进行优化,并以目的蛋白的活性作为优化的评估标准。
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