




一旦确定了缓冲液的pH值,三羟甲基****快速,就需要选择使用什么样的缓冲体系。首先是在选择缓冲体系时要确保选择的缓冲体系在你设定的pH值上确实具有缓冲能力。选择的缓冲体系,其解离常数pKa值应该在设定的pH上下一个pH值单位内。
再者是确保你使用的缓冲液浓度足够高以达到实际缓冲溶液的作用,正常一般选择的浓度是20~100mM。需要记住的是你所使用的缓冲体系不应该影响蛋白活性!例如,磷酸盐会**激酶的活性,所以反应前应彻底地透析掉。
常用贮液与溶液
1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,三羟甲基****生产好,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L**胺(ammonium acetate):将77.1g**胺溶解于水中,三羟甲基****研发好,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤。
1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,济南三羟甲基****,分成小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯)于足量的异中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹
或贮存于-20℃。
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