




缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围,例如,在碱性介质及铁存在下,可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,为了防止芳香胺类的干扰以pH在10士0.2时为适宜。为此,就需要在待测溶液中加入氨一氯化钱缓冲溶液调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。
三羟(Tris)是一种应用非常广泛的有机**,它的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。它及其衍生物被广泛应用于生**学和分子生物学实验中的缓冲液的制备,可用于制作、有机合成、生物缓冲剂等。其中在生化实验中,许多蛋白质及核酸相关的实验都需要用Tris作为生物缓冲剂。它甚至有超过磷酸盐缓冲液的趋势,本文将对其衍生缓冲液进行简述。
一旦确定了缓冲液的pH值,就需要选择使用什么样的缓冲体系。首先是在选择缓冲体系时要确保选择的缓冲体系在你设定的pH值上确实具有缓冲能力。选择的缓冲体系,工业级氨***报价,其解离常数pKa值应该在设定的pH上下一个pH值单位内。
再者是确保你使用的缓冲液浓度足够高以达到实际缓冲溶液的作用,正常一般选择的浓度是20~100mM。需要记住的是你所使用的缓冲体系不应该影响蛋白活性!例如,磷酸盐会**激酶的活性,所以反应前应彻底地透析掉。
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