




Tris中文全称三羟,CAS77-86-1,是重要的生物缓冲剂和酸量滴定法基准物质,有着极其广泛的社会使用性。三羟:它可以和***一起作用,但在有些系统中也起**作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris缓冲液,4℃时是8.4,37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想。
10mg/ml牛蛋白(BSA):加100mg的牛蛋白(组分V或分子生物学**级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,
须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇
至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
TBST缓冲液 TBST中含有Tris-HCl,N***,碱性三(羟甲基)****厂家,tween20这三种物质,是做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质,并且维持一个接近的天然环境。其中,Tween是一种离子表面活性剂,可加速非特异性结合的分离。因为Western Blotting中所用的膜可以与蛋白质结合,孵育过程中,能够与膜非特异性结合。为了防止以后**造成胶片背景太高,在孵育后,混有Tween 20的TBS 能够将非特异性结合的洗掉,增加特异性。
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