




总的来说,TCEP是这三个还原剂中稳定的,但它也是昂贵的。我通常在纯化过程的缓冲液中添加DTT,在后保存酶液的缓冲液中添加TCEP。一般比较合理的还原剂浓度是5~10mM。基本上你要确保还原剂浓度要远远高于你的蛋白浓度。因为DTT和巯在室温下就会降解,所以需要将添加了还原剂的缓冲液处于低温保藏,或者在使用时再添加还原剂。
5mol/L氯化钠(N***):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。
10N(NaOH):溶解400g颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),完全溶解后用水定容至1L。
10%SDS(十二****钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或等强酸、强碱进行调节, 以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,碱性三羟甲基****厂家报价,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被*坏了,作用也就失去了,缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。
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