




TBST缓冲液 TBST中含有Tris-HCl,N***,tween20这三种物质,是做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质,碱性三羟甲基****厂家价格,并且维持一个接近的天然环境。其中,Tween是一种离子表面活性剂,可加速非特异性结合的分离。因为Western Blotting中所用的膜可以与蛋白质结合,现货三羟甲基****厂家价格,孵育过程中,能够与膜非特异性结合。为了防止以后**造成胶片背景太高,在孵育后,混有Tween 20的TBS 能够将非特异性结合的洗掉,增加特异性。
Tris-HCl缓冲液的缺点:1、缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1;2、温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,即:△pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,工业级三羟甲基****厂家价格,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。3、易吸收空气中的CO2,湛江三羟甲基****厂家价格,所以配制的缓冲液要盖严密封。
提到缓冲液就不得不延伸一下,这就是Henderson-Hasselbalch方程。
在前面提到,
将等式同时取对数,并简化就可以得到:
或者
这就是Henderson-Hasselbalch方程。
注意:式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度,除了酸性过于强的情况下,由于同离子效应的存在,一般都可用此式计算。
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