很多实验的pH值设定在 7.4以模仿生物条件。假如你的蛋白在这个pH值下是稳定的，那就非常棒了！如果不是，就需要改变pH值找到目的蛋白在溶液中处于可溶性且不会降解的状态。
一个经验法则是：蛋白在它等电点pI附近的pH值溶液中会表现得不易溶解，因为蛋白在其等电点的pH值溶液中表面没有净电荷，从而容易聚集。这里推荐用Expasy的ProtParam工具快速简便地计算蛋白等电点pI值，现货化妆品添加剂生产商，只要提交蛋白序列即可。
TBST缓冲液 TBST中含有Tris-HCl，化妆品添加剂生产商，N***，tween20这三种物质，是做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质，并且维持一个接近的天然环境。其中，Tween是一种离子表面活性剂，可加速非特异性结合的分离。因为Western Blotting中所用的膜可以与蛋白质结合，孵育过程中，能够与膜非特异性结合。为了防止以后**造成胶片背景太高，在孵育后，混有Tween 20的TBS 能够将非特异性结合的洗掉，增加特异性。
Tris理化性质：
英文名 Trometamol
中文名： 三羟
分子量： 121.135
分子式： (HOCH2)3CNH2
外观： 白色晶体粉末
溶解性：溶于水和乙醇，现货化妆品添加剂生产商，微溶于、苯，不溶于、。
pKa：室温下为8.1，水溶液pH10.5
缓冲范围：7.0-9.2
Tris缓冲液通常被用作核酸和蛋白质的溶剂，工业级化妆品添加剂生产商，由于生物缓冲剂Tris的2号位碳原子连有氨基，水溶液呈碱性，DNA溶解于此溶液时会被去质子化，从而提高溶解性。作为缓冲剂时，Tris通常需要搭配弱酸使用，比如搭配盐酸使用或者直接做成Tris-HCl盐。除了搭配比较多的HCl外，还经常与醋酸、硼酸搭配使用，以及电泳缓冲液中搭配甘氨酸使用。
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