




使用缓冲溶液的注意事项:不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加**,具有简便准确误差恒定的特点,高纯度三羟基甲基****生产厂家,特别是在做成批样品时更显出它的优越性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,因该器皿不密闭,易造成氨的挥发(醋酸-缓冲液中的醋酸也同理),从而,导致溶液失效,正确的做法是缓冲液应适量配制,使用后及时密闭并置于低温中保存。
TBST缓冲液 TBST中含有Tris-HCl,N***,tween20这三种物质,是做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质,并且维持一个接近的天然环境。其中,Tween是一种离子表面活性剂,可加速非特异性结合的分离。因为Western Blotting中所用的膜可以与蛋白质结合,孵育过程中,能够与膜非特异性结合。为了防止以后**造成胶片背景太高,在孵育后,混有Tween 20的TBS 能够将非特异性结合的洗掉,增加特异性。
生物缓冲剂Tris被人熟知的应用,就是用作核酸和蛋白质的溶剂以及生物缓冲剂。Tris-HCl,N***,tween20这三种物质可组成TBST缓冲液,是做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液;Tris-HCl中加入EDTA可制成TE缓冲液,可用于DNA的稳定和存储;将调节pH值的酸溶液换成,可获得TAE缓冲液,换成硼酸可获得TBE缓冲液,这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。
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