蛋白制备及纯化过程中缓冲液的选择非常重要，合适缓冲液才能保证蛋白的活性和结构稳定。
当我们纯化蛋白时，的就是要保持蛋白在纯化过程中不能失活，或者是尽量降低纯化过程对蛋白活性带来的损失。这就意味着蛋白在整个纯化过程中要始终保持可溶性和活性。
因此设计一个防止蛋解和聚合的蛋白纯化缓冲体系就非常重要了，尤其会凸显在实验结果上。在设计缓冲buffer时应考虑以下几个因素：pH值、缓冲体系、盐离子、还原剂和稳定剂。其中每一个因素都要根据你的目的蛋白进行优化，并以目的蛋白的活性作为优化的评估标准。
TBST缓冲液 TBST中含有Tris-HCl，N***，tween20这三种物质，是做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质，并且维持一个接近的天然环境。其中，Tween是一种离子表面活性剂，可加速非特异性结合的分离。因为Western Blotting中所用的膜可以与蛋白质结合，孵育过程中，能够与膜非特异性结合。为了防止以后**造成胶片背景太高，广东工业级缓血酸铵，在孵育后，混有Tween 20的TBS 能够将非特异性结合的洗掉，增加特异性。
5mol/L氯化钠（N***）：溶解29.2g氯化钠于足量的水中，工业级缓血酸铵厂家，定容至100ml。
10N（NaOH）：溶解400g颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），完全溶解后用水定容至1L。
10％SDS（十二****钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100ml。
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