




后,可以通过添加一些稳定剂到蛋白纯化缓冲液中,以帮助提高蛋白纯化时的溶解度和稳定性。在缓冲液中添加惰性蛋白BSA某种程度可以稳定蛋白,但必须确保这些加入的稳定蛋白不干扰实验。有时添加甘油、聚乙二醇等添加剂可以增加缓冲液粘度,有助于防止蛋白聚集。另外,使用少量的表面活性剂和一些离子化合物如**盐、氨基酸、柠檬酸等可以屏蔽蛋白间的离子相互作用,帮助蛋白溶解。
1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯)于足量的异中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹
或贮存于-20℃。

此外,一些缓冲体系对温度非常敏感,例如Tris-HCl缓冲液,如果你在25℃时将缓冲体系调至pH值8,pH值将在5℃时增加到8.58而在37℃时降到7.71。所以,现货3丙二醇报价,如果打算在4℃条件下保存蛋白或在37℃进行实验,就应该考虑到室温下调的pH值可能在实验条件中就不适用了。 其他类型的色谱分离柱,如凝胶过滤柱和Ni2+ 亲和层析柱,可能需要更高的盐浓度。我一般用高达500 mM N***进行高盐淋洗,以防止蛋白和柱之间的非特异性结合。
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