Amicon®Ultra-0.5超滤离心管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复 杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样 本处理,获得较高的样本回收率(通常>90%),并达到30倍的浓缩。根据标称分子量限值(NMWL)的 不同,典型处理时间为10-30分钟。超滤膜的垂直设计也程度降低了溶质极化造成的滤膜结垢; 死体积设计能有效防止过度离心使样本干掉而造成样本损失。收集滤出液后,浓缩样本(截留部分)可 通过一个简便的倒置(上下反转)离心步骤而实现***回收。Amicon®Ultra-0.5超滤管未经消毒,仅 供一次使用。
Amicon®Ultra-0.5产品系列包括5种不同的截留分子量(即标称分子量限值,NMWL)。这些超滤管 仅供研究使用,不适用于诊断程序。
Amicon® Ultra 3K 超滤管 — 3,000 NMWL
Amicon® Ultra 10K 超滤管 — 10,000 NMWL
Amicon® Ultra 30K 超滤管 — 30,000 NMWL
Amicon® Ultra 50K 超滤管 — 50,000 NMWL
Amicon® Ultra 100K 超滤管 — 100,000 NMWL
应用
浓缩含有抗原、***、酶、核酸(DNA/RNA样本,单链或双链)、噬菌体等微生物样本,外泌体 (exosome),微粒(如微珠、纳米材料)等
纯化***培养提取液或细胞裂解液中的大分子成分,去除反应液中的引物、接头或分子标记,在 HPLC前去除蛋白质
除盐,缓冲液更换,或渗滤
所提供的材料
Amicon®Ultra-0.5超滤管提供了两个微量离心管。在操作过程中,一个用于收集滤出液,而另一个用 于回收浓缩后的样本。
配套设备
可容纳1.5 mL微量离心管的固定角度转子离心机。
注意:为了避免离心过程中设备的损坏,在离心之前请清理、检查设备。
适用性评估
在尝试一个新的应用或建立新操作流程时,建议进行初步的回收和截留实验。请参看“如何量化回收” 部分。
超滤管的储存
(15-30℃)室温存放。
预清洗
Amicon® Ultra-0.5超滤管的超滤膜含有痕量甘油。如果担心干扰后续分析,可用缓冲液或Milli-Q® 水进行预清洗。如果干扰仍然存在,可用0.1 N NaOH清洗,再用缓冲液或Milli-Q® 水清洗并甩干。
注意:Amicon® Ultra超滤离心管中的滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使 用,则让液体保留在滤膜上,直到使用。
如何使用Amicon® Ultra-0.5超滤离心管
1.将Amicon® Ultra-0.5超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。
2. 向Amicon®Ultra内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。
3. 将盖好盖子的超滤管放入离心转子中,让盖子的连接带朝着转子的***;用一个类似的超滤管平衡。
4. 以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。为了确定合适的离心 时 间,请参看图1和表2。
5. 离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。
6. 为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在一个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖 子朝着转子的***;用一个类似的超滤管进行平衡。以1,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从 超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。 说明:要达到理想的回收效果,请尽早进行倒置离心。