




为什么需要冻存袋?
细胞培养的传代及日常维持过程中,在培养器具、培养液及各种准备工作方面都需大量的耗费,而且细胞一旦离开活物开始原代培养,它的各种生物特性都将逐渐发生变化并随着传代次数的增加和体外环境条件的变化而不断有新的变化。因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;细胞储存在液氮中,温度达-196℃,冻存袋供应商,理论上储存时间是没有限制的。

冻存袋实验前的准备
生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、等速降温机
冷冻方法理论准备:
(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-8O℃16~18小时(或隔夜)--->液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量消失,亦可跳过此步骤直接放入-8O℃冰箱中。
(2)程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-8o℃以下) -120℃,CS250冻存袋供应商,再放在液氮槽长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。

冻存袋的应用
对于需要保存5年以上的体外细胞的方法,-196°℃的深低温液氮保存简便,CS50冻存袋供应商,实用.冻存后的细胞损伤小活力高能保障患者移植后造血功能的早期***,反之则导致造血功能***的延迟甚至失败.原有的液氮罐保存方式是将装有千细胞的冻存袋放入圆筒状的容器中后,再放入液氮罐中保存,由于冻存袋与圆筒状的容器形状尺寸的不匹配冷冻保存时会造成冻存袋的变形导致千细胞被挤压受损甚至消灭,且受液氮罐空间限制能冻存的数量有限.针对如何经济,较大容量的保存细胞.

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