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在实验中,固相萃取小柱的种类很多,具体实验工作中,SCIEX耗材供应商,应根据分析对象、检测手段和实验室条件,合理选择填料和合理规格的固相萃取柱。
固相萃取柱是一种从层析柱发展而来的提取、分离、浓缩样品前处理设备。适用于各类食品、农畜产品、环境样品及生物样品中目标化合物的预处理。比较常用的方法是将所测物质通过该吸附剂,保留所测物质,再选用适当的强度溶剂冲去杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱测物质,固相萃取小柱,从而达到快速分离、净化、浓缩的目的。吸附剂与目标化合物之间以疏水相互作用为主,主要为非极性-非极性相互作用,为范德华力或色散力。离子化固相萃取的吸附剂是带电荷的离子交换树脂,目标化合物为带电荷的化合物,与吸附剂之间的相互作用为静电吸引。固体萃取中吸附剂(固定相)的选择主要取决于目标化合物的性质和样品基质(即样品的溶剂)。
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固相萃取柱:固相萃取是一种应用广泛、广受欢迎的样品前处理技术,它是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附、与样品基体及干扰物分离,再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离富集目标化合物的目的。这种方法是在传统的液-液萃取基础上,结合目前广泛使用的液相色谱和气相色谱固定相的基础知识,利用物质相似作用的相似相溶原理开发出来。
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固相萃取柱提取工艺:
在样品提取前,要用一整管溶剂冲洗试管,以润湿固相萃取柱填料。反相型硅胶和非极性吸附介质,通常用水溶性有机i溶剂如甲i醇预处理,然后用水或缓冲溶液。在甲i醇湿吸附剂的表面和渗透性结合的烷i基相上,东莞SCIEX耗材,使硅胶表面的润湿效率更高。有时候预处理溶剂在甲i醇之前使用。这类溶剂通常和洗脱溶剂类似,主要用于去除固相萃取管中的杂质,以及它们对分析物的干扰,也可能是只溶于强洗脱溶剂。
正相型固相萃取硅胶和极性吸附剂介质,通常对样品所在的有机i溶剂进行预处理。在样品加入去离子水或低浓度的离子缓冲溶液中进行预处理,在非极性有机i溶剂中使用离子交换填料,在样品加入前应保证萃取柱保持湿润。样品加入前,在萃取柱中干燥填充后,重复进行预处理过程。再引入有机i溶剂前,用水冲洗缓冲液中的盐份。
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坡度洗脱的流动相选择不当要注意溶剂的溶解性,不相容性溶剂不能作为梯度洗脱的流动相。部分溶剂混溶于一定比例,超过一定范围后就不能互溶,使用时更要注意。同时,在与缓冲溶液混合时,也会发生与缓冲剂混合,在使用过程中需要特别注意。不计空白梯度洗脱为保证良好的重复性,梯度洗脱的溶剂纯度要求较高。由于弱溶剂中的杂质在色谱柱上被强溶剂洗脱,在分析样品之前,必须对样品进行空白梯度洗脱,识别溶剂杂质峰。分级洗脱溶剂需要完全脱气,以防止在混合过程中产生气泡。没有考虑溶剂混合引起的粘度变化由于混合溶剂的粘度随组分而变化,因此,在梯度洗脱过程中常常会发生压力变化。比如,和水的粘度都比较小,SCIEX耗材南区***,当它们以相似比例混合时,粘度增加很大,这时的柱压比或水为流动相时大一倍。所以在梯度洗脱时要注意防止压力超过输液泵或色谱柱可以承受的大压力。
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六通阀的正确使用与维护①样品进样前,要用0.45μ的滤膜过滤,以减少微粒对进样阀的磨损。②旋转阀芯时不要太慢,不要停留在中间位置,否则流动相受阻,使泵内压力急剧上升,SCIEX耗材公司,甚至超过了泵的大压力;再转到进样位置,过高的压力会使柱头损坏。③为了防止进样阀内的缓冲盐及样品残留,每次分析结束后应冲洗进样阀。一般可采用清水冲洗,或先用溶样溶剂冲洗,再用清水冲洗。
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