细胞冻存的操作步骤
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血的冻存培养液；
2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，200-074-400冻存袋报价，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；
4. 离心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，CS50冻存袋报价，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的密度为5×106/ml～1×107/ml；
6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；
8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
冻存袋注意事项
可用于细胞在-196℃液氮中的存储和转运。所有冻存袋都是无菌即用型包装。冻存袋对于大量细胞的冻存非常方便，但使用过程中还有些小地方需要注意。较大冻存体积的推荐是参照冻存袋平放，液体厚度8mm时液体的体积。增加冻存液体的量，冻存袋到是能装下，但细胞复苏的时候就麻烦了，液体厚度太大，融化所需时间太长，细胞活率要受很大的影响啊！
冻存袋的原理
细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以较大限度的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或DMSO作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，200-074-401冻存袋供应商，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，北京冻存袋，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。
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