




细胞复苏冻存袋
1. 从液氮容器中取出冻存管,冻存袋哪家好,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,200-074-401冻存袋哪家好,混匀;
3. 离心, 1000rpm,200-074-401冻存袋哪家好,5min;
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;
5. 次日更换一次培养液,继续培养。

冻存袋的历史起源
细胞培养技术创建于1907年,历经一个世纪磨练与升华,现已成为自然科学领域不可缺少的研究方法之一。小伙伴们要想在如今细胞培养技术广泛渗透的科学研究领域搞好科研,基础的细胞株的冷冻保存和解冻复苏技术自然不能忽视。细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,起到了细胞保种的作用。
冻存袋实验前的准备
生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、等速降温机
冷冻方法理论准备:
(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-8O℃16~18小时(或隔夜)--->液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量消失,亦可跳过此步骤直接放入-8O℃冰箱中。
(2)程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-8o℃以下) -120℃,再放在液氮槽长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。

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