CS50冻存袋供应商-冻存袋-北京思齐生物技术公司

细胞冻存的操作步骤

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血的冻存培养液；

2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，200-074-401冻存袋报价，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；

4. 离心1000rpm，5min；

5. 去除胰蛋白酶，CS50冻存袋供应商，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的密度为5×106/ml～1×107/ml；

6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；

8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

冻存袋介绍

细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。连续培养的细胞系容易发生遗传漂变，有限细胞系终会发生***，CS50冻存袋，所有培养的细胞都易受到微生物污染。已建立的细胞系是一种宝贵资源，更换细胞系成本高昂，而且耗费时间。可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。

冻存袋的基本原理

利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。 细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%．15%的甘油或DMSO，冻存袋，可使溶液冰点降低，加之在缓慢***条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。 采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min，当温度低于-25℃时可加速，到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。