逆转录病毒包装-友名生物公司(图)

PCR核酸检测实验室布局建设

核酸检测前的生物安全防护（工作人员个人三级防护的穿戴）

1、穿戴流程：在***扩增实验室的清洁区（更衣区）或者普通实验室的洁净区，工作人员按顺序依次穿戴好一次性帽子、医1用N95口罩、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、防护目镜和双层乳胶手套，进入样本处理工作区域或实验室。

2、要点提示：

2.1、具备标准***扩增布局条件的实验室，应在清洁更衣区做好个人三级防护，条件有限的实验室亦可选择在一洁净的实验室中按流程穿戴好个人三级防护。

2.2、需佩戴医1用N95口罩，若无医1用N95口罩，可以考虑用普通N95/KN95口罩外加一次性外1科口罩的组合方式，但不要佩戴有呼吸阀的N95口罩。

2.3、佩戴N95口罩时需检查密闭性，通过双手按压、深呼吸、左右转头等动作严格检查口罩是否佩戴正确。

2.4、一次性防护服已具备新型冠状病毒核酸检测的防护需求，有条件时可以考虑加穿一次性反穿隔离衣，穿衣时需由他人协助。

2.5、穿戴整齐的工作人员，应按要求尽快进入样本处理的实验区域开展工作，严禁穿戴三级防护后再进入普通实验区域或办公区域。

腺病毒的结构

腺病毒含13%DNA和87%的蛋白质，病毒体分子量约为175×106。病毒***组为线状双链DNA，大约含35kb～36kb，腺病毒12、18和31型的DNA组成中，G+C mol%***低（48%～49%），逆转录病毒包装，属于对动物具有高致***性***型。腺病毒1、2、4、5、8等型的G+C mol%较高（61%），致***性反而低或无。这是一种用于人腺病毒分离株的分组的标准，根据其***同源性将人腺病毒分为A～F等6组。

位点特异性重组法

这类方法使用来源于噬菌体的重组酶，这类重组酶能够识别特异性序列位点(长度数十碱基对至数百碱基对)并引发含有该位点的序列之间的重组；在腺病毒骨架和穿梭质粒中添加重组酶能够识别的特异性位点，在细胞内表达对应的噬菌体重组酶或体外使用重组酶，介导骨架质粒和穿梭质粒之间的位点特异性重组，将目的***引入骨架质粒，形成带有重组腺病毒***组的腺病毒质粒；转染包装细胞，进行病毒载体拯救。该方法进一步简化了腺病毒质粒的制备过程，它的缺限是在腺病毒***组的某些部位不可避免的残留了重组酶特异性识别位点。