友名生物公司-DNA标记

DNA提取过程中各种***的作用及原理

溶液III--3mol/L NaAc(pH4.8)溶液：

　　NaAc的水溶液呈碱性，为了调节pH至4.8，必须加入大量的冰醋酸。 所以该溶液实际上是NaAc-HAc的缓冲液。用pH4.8的NaAc溶液是为了把pH12.6的抽提液，调回pH至中性， 使变性的质粒DNA能够复性，并能稳定存在。而高盐的3mol/L NaAc有利于变性的大分子染色体DNA、 RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和核酸上的电荷，减少相斥力而互相聚合.

基于***工程技术制备小分子特异性antibody

通过大量的实验发现，小分子的偶联物并不是不能产生特异性针对小分子的抗1体，而是效价过低，不满足制备多克1隆抗1体和单克1隆抗1体的需要，但是***工程手段为制备该类型小分子特异性antibody提供了新的思路。该技术的在于制备antibody的***文库，通过噬菌体展示技术、核糖体展示技术等获取antibody的目的***，再利用蛋白表达系统制备重组antibody或者改造antibody，以获取针对小分子的特异性antibody。目前随着antibody***测序信息的公布和完善，为人工设计antibody提供了基础，这也会以后小分子特异性antibody的制备提供了新的途径。

为什么用无水乙醇沉淀DNA

　　用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中较常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶， 乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。

　　DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般实验中，是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合，DNA标记，其乙醇的***终含量占67%左右。 因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。

　　但是加95%的乙醇使总体积增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA损失也增大， 尤其用多次乙醇沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵， 后面的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙1醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。