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冻存袋，可千万别这么用哈！

1.不要使用金属管夹

2.不要离心

3.不要在冻存袋上直接写字标识冻存细胞的信息

4.不要在冻存袋表面粘帖标签不推荐使用同一冻存袋多次冻融细胞

5.DMSO稀释以后才能放进冻存袋，200-074-401冻存袋批发，DMSO浓度不要超过10%

6.复苏细胞时建议把冻存袋放在一个保护袋中进行融化

7.不要超过冻存袋推荐的工作体积

细胞冻存袋方法

1、消化细胞（同实验二），将细胞悬液收集至离心管中。

2、1000rpm离心10分钟，弃上清液。

3、沉淀加含保护液的培养，计数，调整至5×106/ml左右。

4、将悬液分至冻存管中，每管1 ml。

5、将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口，CS50冻存袋批发，封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。

6、贴上标签，写明细胞种类，冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。

7、按下列顺序降温：室温→4℃（20分钟)→冰箱冷冻室（30分钟）→低温冰箱(－30℃ 1小时）→气态氮（30分钟）→液氮。

注意：操作时应小心，冻存袋批发，以免液氮。液氮定期检查，随时补充，不能挥发干净，一般30立升的液氮能用1～1.5月。

冻存袋的原理

细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，CS250冻存袋批发，实验证明这样可以较大限度的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或DMSO作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。