mRNA切割酶-武汉友名生物(在线咨询)

几种酶的比较及限制酶

1几种酶的比较

(1)限制性内切酶:作用于DNA分子，切割磷酸二酯键，形成黏性末端或平末端。

(2) DNA连接酶:作用于DNA分子片段，连接磷酸二酯键，形成重组DNA分子。

(3) DNA聚合酶:作用于脱氧核苷酸，连接磷酸二酯键，形成新的DNA分子。

(4)解旋酶:作用于DNA分子，作用于氢键，形成DNA分子的单链。

2.限制酶:

(1)一种限制酶通常只识别一种特定的碱基序列，但是有少数限制酶却可以识别不止

一种碱基序列。

(2)不同限制酶也可以识别同-碱基序列;

(3)不同限制酶识别的碱基序列虽然不同，但切出的末端也可能相互连接。

限制性酶切分析法

限制性酶切分析法是指***组或一段核酸用限制性内切酶消化产生的片段经电泳等方法分离形成特别的条带图谱，对DNA序列的特征进行的分析。限制性酶是生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的***并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用。

限制酶是***工程中所用的重要切割工具。科学家已从原核生物中分离出了许多种限制酶，并且已经商品化，在***工程中广泛使用。根据限制酶切割的特点，mRNA切割酶，可将它们分为两大类：一类是切割部位无特异性的；另一类是可特异性地识别核苷酸序列，即只能在一定的DNA序列上进行切割。

限制性内切酶的质量控制鉴定

限制性内切酶的一个活性单位是指，在50μl 的反应体系里，采用随酶提供的 NEBuffer，用1个小时的时间，消化1μg底物DNA所需要的酶量。酶切反应应在带盖的eppendorf 管中进行，选用技术数据卡上所标明的适宜温度。在确定酶活性之前，浓缩的酶应该用推荐的贮存液稀释成大约1，000 单位/ml。

质量控制

所有质量控制鉴定结果都公布在随酶提供的技术数据卡上。