





脂质体法
是用带正电荷的脂质体作载体携带外源***,与带负电荷的细胞膜融合,把外源***导入细胞。用脂质体法转化原生质体,其毒性较电1击法和PEG法小,且适于运输大分子DNA穿过质膜。
Antonelli等(1990)用该法将***组DNA转入BMS玉米原生质体,获得转化了的再生愈伤***,转化率高达8%。
脂质体法的优点是转化受体为单个细胞,腺病毒提取,易于筛选,不易形成嵌合体,对于原生质体再生能力好的植物品种,是非常好的转化方法。

农bacillus转化法
农bacillus包括引起植物冠瘿瘤的根***农bacillus和引起发根病的发根农杆1菌。根***农杆1菌和发根农bacillus有相似的遗传背景。在农bacillus介导的转化中,80%左右是由根***农bacillus介导的,大约20%是由发根农bacillus介导的。这里主要介绍根***农杆1菌介导的转化。
根***农bacillusTi质粒上有一段转移DNA(T-DNA)和Vir区,在农bacillus侵染植物时,这段T-DNA可以插入到植物***组中,使其携带的***在植物中得以表达。Vir区共24个***,它们表达的蛋白与T-DNA的加工和转移有关。
腺病毒载体应用优势
腺病毒载体转0***效率较高,体外实验通常接近100%的转导效率;可转导不同类型的人***细胞,不受靶1细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达(10E+11)/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞***组,仅瞬间表达,安全性高。因而,腺病毒载体在***治1疗临床试验方面有了越来越多的应用,成为继逆转录病毒载体之后广泛应用且非常具前景的病毒载体。
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