武汉友名生物公司(多图)-腺病毒相关载体

　　农杆1菌转化法在植物遗传转化中的应用：过去认为受农bacillus宿主范围限制，农bacillus介导的遗传转化只限于双子叶植物。1987年Grimsly首先将玉米条斑病毒的cDNA克1隆至质粒上，用农bacillus侵染的方法将玉米条斑病毒的cDNA导入玉米，使植株表现了系统感1染症状。这个报道有力地证明了农bacillus能够侵染玉米这种单子叶植物。随着载体系统和转化方法的改进，农bacillus介导的遗传转化不再局限于双子叶植物，在一些单子叶植物如水稻、玉米和小麦等重要的农作物上也相继获得成功。

　　进入20世纪90年代后，农杆1菌转化法在水稻、玉米等重要的农作物上取得突破性进展。首先是1991年Gould和Shen等利用农bacillus转化玉米茎尖分生***获得转0***植株。1998年Lupotto也实现了农bacillus转化玉米的成功，Southern杂交结果显示外源***能够稳定遗传到下一代。

腺病毒的研究简史

腺病毒对啮齿类动物有致***能力，或能转化体外培养的啮齿类动物细胞。使细胞转化只需要腺病毒***组的一部分，腺病毒相关载体，这些***位于***组的左端，约占整个***组的7%～10%。尽管腺病毒分布很广，但对***不出现致***性。***细胞是一类允许细胞(permissive cell)，即这类细胞允许感1染入1侵的病毒在细胞内copy增殖，***后细胞裂解died而释放出大量1子代病毒。在体外培养的多种***肿1瘤细胞中均未查出腺病毒颗粒，但在人的1号染色体上有adl2的整合位点，这意味着***细胞对于腺病毒也可能是非允许细胞，即这类细胞在病毒感1染后，病毒不能在细胞内copy增殖，但可整合在受感1染细胞的***组内。这些细胞被病毒转化，表型发生改变，且可在体外期地培养传代。    

第yi代腺病毒载体：一般将E1或E3***缺失的腺病毒载体称为第yi代腺病毒载体，此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎1症反应和免1疫反应，纯化后可以安全使用，体内表达周期可达4周。

第二代腺病毒载体：E2A或E4***缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体，产生的免1疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所改进，但病毒包装难度和出毒和病毒滴度下降厉害，应用相当局限。

第三代腺病毒载体：第三代载体缺失了全部的（无病毒载体，gutless vector）或大部分腺病毒***（微型腺病毒载体，mini Ad），仅可保留ITR和包装信号序列。第三代腺病毒载体***大可插入35kb的***，病毒蛋白表达引起的细胞免1疫反应进一步减少，载体中引入核基质附着区***可使得外源***保持长期表达，并增加了载体的稳定性。这一载体系统需要一个腺病毒突变体作为辅助病毒。