冻存袋方法的改进
自1977年以来，我们应用四级梯度降温冻存法对30余株哺乳动物细胞及2株节肢动物细胞共1000多支安瓶进行了冷冻保存，效果较好，大部分细胞的活存率在70%以上。在此基础上对8株抗登革4型(DEN一4)病毒杂交瘤细胞400多支安靓进行了冻存。鉴于四级降温冻存法步骤多，需要经过4℃冰箱和一20℃冰箱长达7~8小时的梯度降温，较难适应单工作中细胞冻存的需要。因此，自1982年以来我们摸索了影响细胞冻存的主要因素，确定了杂交瘤细胞冻存的适保护剂浓度(1.2〕，并研制成功细胞冻存简易装置。
细胞冻存的操作步骤
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血的冻存培养液；
2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；
4. 离心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，冻存袋哪家好，调节冻存液中细胞的密度为5×106/ml～1×107/ml；
6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；
8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
冻存袋操作流程
（1）冰冻当天进入***局域网，查询当日***间冰冻安排表，200-074-401冻存袋哪家好，大致了解当日的冰冻情况，并提前通知当日负责冰冻送片的初检医生，避免遗漏。
（2）取材前确定标本冰冻报告已发出，核对标本病理号、住院号，准确记录其病理号、住院号、姓名（至少有其中2项）于冻存***登记本上。
（3）在新鲜标本取材台上取材，并使用取材器具，同一天使用频繁时，每取完一例标本器具应清洗后浸泡于消毒液中，以防止其他标本污染。
（4）在不影响外检取材的前提下，CS250冻存袋哪家好，充分取材。良变取足够量病灶，CS250冻存袋哪家好，病变取足够量病灶及***旁正常***（***旁正常***远离病灶应尽量>2cm）。
（5）将所取标本切割成直径1～2mm的***块，不同标本及同一标本不同部位装入相应冻存管中，做好标记（注意顺序，切取标本、夹放冻存管都应遵循“先正常-后”的顺序，避免***污染）。
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