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作为一种新型的治i疗手段,***治i疗已进入到临床阶段,目前已受到世界各i国的高度重视。在此过程中,目的***需要导入到***,起到治i疗作用。引进***至受关注的方法是利用载体进行运输。
由于具有安全性好、寄主细胞宽、外源***在体内表达时间长等特点,腺相关病毒(A***)被认为是至有前景的***转移载体之一,在***治i疗和疫i苗研究中得到广泛应用。
为确保 A***相关产品的安全性和质量,需要对 A***衣壳蛋白进行纯度分析。但 A***载体在开发初期,蛋白质含量极i少,甚至更少,这对研究者的分析工作提出了挑战。
采用SDS-PAGE法对银染法或红宝石染色法进行检测,虽然灵敏度较高,但操作复杂、费时。在毛细管电泳的基础上,发展出一种取代 SDS- PAGE的CE-SDS方法,该方法具有分辨率高、定量准确、重复性好、自动化程度高、速度快等优点。
SCIEX公司利用其多年积累的技术优势,研制了一种基于毛细管电泳的腺相关病毒(A***)衣壳。
本方法的主要优点:
1、简单明了的样品制备程序
2、VP1, VP2, VP3分辨率极
3、病毒蛋白的CPA%(校正峰面积%)的RSD小于0.7%
4、样品浓度与吸光度的线性关系良好,R2 =0.9991
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敏感度是质谱的灵i魂,至适用于对微量混合物的分析,一般三重四极杆质谱仪所做的 MRM灵敏度至高,但当需要使用MS2进行谱库检索时,其化合物浓度通常会达到 ug/ml的水平,如果浓度很低,仅残留 ng/ml, MRM的灵敏度不够高,无法准确定性,怎么办?QTRAP?是 SCIEX公司在2002年推出的质谱技术 QTRAP?,可以说是非常酷的硬核技术, QTRAP?系列(Q1qLIT3,第三重质量分析器是线性离子阱 LIT),它既具有三重四极杆的功能,又具有离子阱质谱的功能,可组合使用,同时定性定量,即使浓度低于1 ng/ml,用 QTRAP生成的增强型MS2谱图,也能进行定性检索。
对完全未知物的定性分析有哪些?早些年,高精度质谱较少,而低分辨率质谱,如四极杆等,仍可通过同位素丰度比部分推算出分子式,加上前面提到的扫描模式,还有一台高精度质谱,如X500系列台式 QTOF高分辨质谱等,就更容易获得化合物元素组成,但是,这还不够,还需要配套的质谱结构解析软件和足够的结构解析软件(这里需要强调,我们强大的应用专i家团队,可以将知识传授给你,茂名标准流速泵消耗品,分享经验)。但是,单靠质谱学也是不够的,你可能还需要利用紫外光谱、红外光谱、核磁共i振、 X单晶衍射等技术进行协同研究。
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1990年代后期,制药公司为了提高其药i物发现的效率,采用了诸如组合化学和高通量筛选等新技术。与此同时,它们也在不断开发和改进这些技术,以满足日益增长的流量需求。它还推动了医i药公司对高通量技术的新需求——把每天数百个样本扩展到每天100,000个以上的样本,但是当时,只有使用光学读板技术才能满足这一需求。
近20年来,人们开发了大量的质谱分析系统,标准流速泵消耗品代理,旨在通过提高进样速度来满足较高的流量要求。但是,对于高通量流程的关键问题,没有一个质谱系统能够完全实现这个目标。进样速度只是许多问题中的一部分,样机速度问题的解决仅仅是高通量分析的一部分。在2008年 SCIEX发布 FlashQuant?技术后,高通量分析的关键瓶颈问题就变得更加清晰了(图1),即必须在一个系统中加以解决, SCIEX一直在研究,开发新技术,逐一解决这些关键瓶颈。
首先要解决的瓶颈问题是毫秒等压分离,因此在2009年, SCIEX推出了 SelexION?差分离子体技术, SCIEX与俄罗斯科学家合作开发的一种新技术,是 SCIEX与俄罗斯科学家合作的成果,标准流速泵消耗品供应商,是质谱系统的一部分,而非液相系统的一部分。另外五个问题需要解决,才能使差分分离子技术充分发挥其商业潜力。
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