






20世纪40年代以前,对于***的化学本质并不了解。直到1944年O.T.埃弗里等证实双球菌的转化因子是DNA,才用实验证明了***是有遗传效应的DNA段。
1955年S.本泽用大肠T4噬菌体作材料,研究快速溶菌突变型rⅡ的***精细结构,发现在一个***内部的许多位点上可以发生突变,并且可以在这些位点之间发生交换,从而说明一个***是一个功能单位,但并不是一个突变单位和交换单位,因为一个***可以包括许多突变单位(突变子)和许多重组单位(重组子)(见互补作用)。
1969年J.夏皮罗等从大肠中分离到乳糖操纵子,并且使它在离体条件下进行转录,证实了一个***可以离开染色体而***地发挥作用,于是颗粒性的遗传概念更加确立。随着重组DNA技术和核酸的顺序分析技术的发展,对***的认识又有了新的发展,主要是发现了重叠的***、断裂的***和可以移动位置的***。
真核细胞同源重组法
1994 年,Graham F建立了在293细胞同源重组产生重组腺病毒的方法。这个方法需要2个质粒:骨架质粒含有腺病毒绝大部分***组序列,但不含有包装信号;穿梭质粒含有ITR、包装信号和目的***克1隆位点,以及两段与骨架质粒有重叠的序列。将目的***克1隆到穿梭质粒,与骨架质粒共转染293细胞,由于这两个质粒的部分序列有重叠,能够在细胞内发生同源重组,植物载体,***终产生完整的载体***组,并包装出重组病毒颗粒。该方法曾经被广泛使用,推动了腺病毒载体的发展。由于细胞内重组效率低,某些重组事件还可能产生可copy病毒(RCV),必需经过噬斑纯化才能获得正确的克1隆化的重组病毒,费时费力,正逐渐被其他方法替代。
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