





植物的遗传转化是以植物器1官、***、细胞或原生质体作为受体,通过某种技术或途径转入外源***,获得外源***稳定表达的可育植株。遗传转化可以打破物种界限,有目的地实现物种之间或物种内部遗传物质的交流,为植物的遗传改良开辟了一条新的途径。
植物遗传转化方法就是通过特定的方式将外源***导入到受体细胞内,使之发生定向的遗传变异。目前,已经建立了多种转化系统。对于大多数遗传转化系统而言,遗传转化方法是遗传转化系统的关键环节,决定着转化的成败及效率。用于植物的遗传转化方法有许多:农杆1菌介导法、***法和PEG法等。
在转0***植物中,用农杆1菌介导法获得的转0***植物占80%,但大多集中在双子叶植物上。自从***问世以后,单子叶植物中的禾谷类作物的遗传转化获得了迅速发展。农杆1菌介导法和***法已成为目前用于遗传转化的主要方法。

***转化法
气动式***中具有代表性的是PDS-1000/He,利用由不同厚度的聚苯四甲酰亚1胺膜制成的可裂圆片来调控氦气压力。当氦气压力达到可裂圆片的临界承受压力时,可裂圆片破1裂并产生强烈的气流,使微弹载体携带微弹高速运动,遇到刚性的阻挡网,微弹载体被阻遏,而微弹利用惯性继续向前高速运动,轰击靶1细胞或***,从而携带外源***进入细胞内。***法不再受到受体***型的限制,腺病毒浓缩,又能避开原生质体再生的障碍,从而使植物的遗传转化翻开了新的一页。
***转化法在植物遗传转化中的应用:应用***法转化***早的是Klein等人在1987年将携带有***氯霉1素乙酰转移酶(cat)***的烟1草花叶病毒的RNA导入洋葱的表皮细胞,使此***得到表达。后来,随着对物理参数(如金属粒子的理化特性、DNA与金属粒子的结合和靶***特性等)、环境条件(如受体植株、外植体和靶***所适宜的温度、湿度和光照等)和生物因子(如外植体及其轰击前后的培养条件等)等的技术优化,不断完善的***转化技术能实现对许多受体材料的转化,包括原生质体、悬浮细胞系、愈伤***、外植体(幼穗、幼胚或成熟胚),甚至可以直接轰击转化花粉。
腺病毒传播特点
宿主范围广对人致病性低,腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感1染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和***中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮细胞性,而人类的大多数的肿1瘤就是上皮细胞来源的。另外,腺病毒的copy***和致病***均已相当清楚,在人群中早已流行(70-80%***体内都有腺病毒的中和抗1体存在)。人类感1野1生型腺病毒后仅产生轻微的自限性症状,且病毒唑cure有效。
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