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高i效液相色谱法概述:
高i效液相色谱 (高i效液相色谱)作为一种高i效、快速的分析分离技术,在上个世纪70年代得到迅速发展,是现代分离检测的重要手段。层析法的分离原理是:当溶解于流动相(mobile phase)的各组分通过固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和),其大小、强弱不同,在固定相中的滞留时间也不同,从而先后从固定相中流出。也叫色层法,色谱法。
高i效液相色谱是从经典的液相色谱方法发展而来,它以液体为流动相,并且采用了微粒细粒高i效固定相的柱层析分离技术。它的分离机理与普通的柱色谱一样,纳升级流速消耗品批发厂家,但填料更精细,需要高压泵推动,柱效高,分析速度快。在液相色谱中,流动相也参与了组分的分离过程,其组成、比例和 pH值可以灵活调整,分离方式多样。实践中,对不同样品进行分离,主要是通过改变流动相组成来调节样品在色谱柱的保留程度和选择性。
高i效液相色谱技术自上世纪60年代出现以来,由于采用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品快速、高i效、灵敏的分离检测。高i效液相色谱技术的引入,使液相色谱吸收了经典液相色谱的发展经验,大大提高了仪器的自动化水平和分析精度。目前采用微处理器控制的液相色谱系统,不仅自动化程度高,而且可以控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等),同时还可以缩放、叠加得到的色谱图,并对保留的数据和峰高、峰面积进行处理等,为色谱分析工作者提供了一种、全功能的分析工具。
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高i效液相色谱的工作原理及常用类型:
高i效液相色谱的工作原理是怎样的?
柱色谱中,在重力作用下,将溶剂滴入一个装有吸附剂的色谱柱中。高i效液相色谱是一种改进的柱色谱法。当高压达到400个大气压时,泵将溶剂输送到色谱柱中。柱状吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如硅石或聚合物)制成的颗粒材料。
和柱状色谱相比,采用泵输送,既能快速分析,又能用较小的颗粒作柱填料。颗粒越小,表面积越大,阳江纳升级流速消耗品,通过固定相与流动相以及样品组分之间的相互作用,就能更好地实现混合物中的组分分离。一般情况下,流动相是一种溶剂的混合物(例如水,)。
由于混合物组分与吸收剂粒间相互作用的程度不同而相互分离,在此过程中,不同组分的洗脱率不一样,造成了组分离分离。高i效液相色谱的自动化程度高,与柱色谱相比,具有较高的灵敏度。
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近视是一种日益普遍的眼病,它会导致人们在观察远处物体时变得模糊。利用蛋白质组学技术,香港科学家对影响眼睛正常发育和导致近视的因素进行研究。
蛋白组学是指在特定***状态下所涉及到的大量蛋白质,并从中找到影响人类和动物正常发育的外部环境或遗传因素。香港科技大学视光学院副 利用蛋白质组学技术,对多种眼疾进行研究,特别是近i视眼。该人描述了他在实验室里如何利用 SCIEX仪器进行研究:“我大约15年前从香港理工大学毕业,拿到了博士。长期以来,我对近视的研究非常感兴趣,纳升级流速消耗品广东***,这是我攻读博士期间研究的***。但是在这之前,我们完全了解了蛋白质组学以及这项技术能够为我们提供更深入的信息。蛋白质组学对很多临床研究非常有用,如近视、青i光眼、黄斑变性、i感i染等。在蛋白质组学的研究中,发现新蛋白质间的相互作用可能会给带来更好的方法,因此我决定要在这方面进行一次探索。”
“眼睛是这类蛋白质组研究的理想模型,纳升级流速消耗品批发,我们可以将一只病眼与一只健康的眼睛直接进行比较,因为它们的遗传模式是相同的。研究期间,曾用2- D凝胶技术来分析动物眼睛里的蛋白质,这非常耗时。但是到那时,几乎没有其他方法可供选择,对利用蛋白质组研究近视的技术几乎一无所知。另外,某些***类型(如眼液)不能使用凝胶技术,这限制了我们的工作。只是在几年之后,人们才开始从使用二维凝胶技术转向使用液相色谱-质谱法,这促使我在7年前左右购买了离子阱和MALDI-TOF质谱仪。遗憾的是,我没有时间去理解这个系统的复杂性,这使我在硬件和软件使用上遇到困难,导致蛋白质组学研究被搁置数年。但是这些都是在我接触 SCIEX之前发生的。
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