细胞冻存
细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。
加入lml冻存液（90%血1清，10%DMSO），放入冻存盒内（盒内有异丙1醇，以保证温度降低的速度），立即放入一80℃冰箱内，iPS细胞相关，过夜，第二天放入液氮中，可以保存至少两年，如不放人液氮，可以保存三个月。
冻存液的配制：70%的完全培养基+20%FBS+10%SO要慢慢滴加，边滴边摇。
微生物细胞培养
微生物多为单细胞生物，生存条件比较简单。所以微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多。其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂，因为严格厌氧需要维持二氧化碳等非氧的惰性气体浓度，而好氧微生物则只需要通过不断搅拌提供无菌氧气。微生物对培养条件要求不如动植物细胞那样苛刻，玉米浆、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏等成为良好的微生物天然培养基。对于一些特殊微生物的营养条件要求，可以在这些天然培养基的基础上额外添加。
经过了近十多年既漫长又短暂的发展，iPS细胞技术已经取得了举世瞩目的进展。一个个突破性的成果既给我们带来了喜悦，也带来了新的挑战，细胞重编程有望迎来一个新的研究浪潮。尽管iPS细胞有着诱人的应用前景，然而，未来iPS细胞的研究也面临着许多亟需解决的问题：
首先，效率问题。目前，诱导产生iPS细胞的率仍然很低，这与***导人的方式整合位点、表观遗传学等多种因素有关。这已成为制约iPS从实验室走向临床的***大瓶颈。因此，如何提高iPS细胞的制备效率仍是人们普遍关注的问题。
第二，安全性问题。现在诱导iPS细胞通常借助逆转录病毒为载体，将几种******转入分化细胞诱导其成为iPS细胞，而这种方法就有可能会因为外源***插入细胞***组，干扰了内源***的表达，从而诱发cancer。
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