为什么需要冻存袋？
细胞培养的传代及日常维持过程中，冻存袋批发，在培养器具、培养液及各种准备工作方面都需大量的耗费，而且细胞一旦离开活物开始原代培养，它的各种生物特性都将逐渐发生变化并随着传代次数的增加和体外环境条件的变化而不断有新的变化。因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；细胞储存在液氮中，温度达-196℃，理论上储存时间是没有限制的。
细胞冻存步骤
1.用移液器吸走原培养基，加入适量PBS洗1-2遍;
2.加入适量胰酶，置于培养箱中消化;
3.待消化到位后加入适量血浆或完全培养基终止消化，CS250冻存袋批发，800-1000rpm离心3-5min;
4.配制冻存液，待细胞离心后去上清，加入冻存液重悬，调整细胞浓度为3×106~1×107 cells/mL，转移到冻存管中;
5.将冻存管放入程序降温盒中，-80度过夜，然后转移到液氮中保存。
6.冻存细胞后应取出一管复苏，检测细胞的存活率。理论上细胞可在液氮内长期保存，200-074-400冻存袋批发，
为稳妥起见可在细胞冻存半年后复苏培养，观察细胞生长情况，再继续冻存
细胞冻存袋方法
1、消化细胞（同实验二），将细胞悬液收集至离心管中。
2、1000rpm离心10分钟，弃上清液。
3、沉淀加含保护液的培养，计数，调整至5×106/ml左右。
4、将悬液分至冻存管中，200-074-401冻存袋批发，每管1 ml。
5、将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口，封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。
6、贴上标签，写明细胞种类，冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。
7、按下列顺序降温：室温→4℃（20分钟)→冰箱冷冻室（30分钟）→低温冰箱(－30℃ 1小时）→气态氮（30分钟）→液氮。
注意：操作时应小心，以免液氮。液氮定期检查，随时补充，不能挥发干净，一般30立升的液氮能用1～1.5月。
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