友名生物-分子伴侣蛋白

工业应用领域

① 皮革脱毛：酶脱毛（50-55℃， PH7.0-8.0，20—25u/ml）→ 水洗 → 浸酸 →鞣制。

② 胶片回收银：50℃， PH9.5-10.5，分子伴侣蛋白，用20—23u/ml进行回收。

③丝绸脱胶：预处理 → 脱水 → 酸处理（蛋白酶18—24u/ml，肥皂0.75%， 48—50℃，30—60分钟，PH7—8）→ 脱水 → 扯皮 → 冲洗 → 脱水 → 抖松 → 烘干 → 抖松。

④ 饲料加工的应用：该酶与α—淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、糖化酶等复合使用。可广泛应用于仔猪、育成猪、禽类、鱼类的饲喂，可将酶制剂加入饲料后，人为的控制温度、湿度、PH和作用时间，使物料在酶的作用下得到一定程度的降解。小规模饲养时可将酶制剂直接添加到饲料中，经充分拌和后饲喂畜禽，拌和时应采用逐步扩大的拌和方法，以保证酶在饲料中的均匀分布。通常用量为饲料的0.1—1.0%。

蛋白质含量测定操作方法

1.标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲***。充分摇匀后，在室温（20～25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的首支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横座标，光吸收值为纵座标绘制标准曲线。

2、样品的测定：取2～3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。

无细胞系统是利用细胞提取物（而不是细胞）进行***转录和翻译的系统。一个无细胞***表达系统主要包括三个部分：细胞提取物，反应混合液，以及核酸模板

1.细胞提取物：从细胞中提取的物质，主要包含核糖体、RNA聚合酶、其他转录和翻译蛋白（比如σ因子、起始因子和延伸因子），以及用于能量代谢的酶和辅因子。在有些菌株的提取物中，可能***了蛋白酶和核酸酶的活性。

2.反应混合液：包含蛋白质合成所需的一些原料，如氨基酸、核苷酸、盐离子（如铵盐、镁、钾）、能源（糖类、磷酸肌酸等）、拥挤***（crowding agents）、代谢辅因子（辅酶A、NAD）、缓冲液、tRNA以及其他代谢添加剂等。

3.核酸模板：可以是质粒DNA或PCR产物线装DNA，浓度通常在1-20 nM。

无细胞系统一般的反应体积为10微升，但是根据其实际应用，反应体系可以从10^(-15)到10^3变化。在开始反应时，将三种组分在16-37℃下孵育，蛋白质合成将在1-24h内进行。