




细胞冻存袋操作需要注意?
1.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15m培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。
2.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。
3.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响 细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是 10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。

冻存袋的储藏空间
储藏空间内能够非常贴合地放置细胞冻存袋,并稳定细胞冻存袋,筒体亦是非常贴合地放置于冷冻装置内部,筒体底部通孔能够透进冷冻液,使得筒体处于均匀低温的状态,可较好的保持细胞活性;整个稳定装置轻便实用,能够长时间进行细胞的保存及运输,具有极高的经济效益.一种用于细胞培养的冻存袋,包括采血袋所述采血袋上至少设有一根采血针,所述采血针通过采血管与采血袋相连,
细胞冻存的方法
1.细胞:选对数生长期细胞,200-074-400冻存袋供应商,收集细胞24小时前换液一次。
2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,CS250冻存袋供应商,吸入离心管中。
3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。
4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。
5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,冻存袋供应商,以防液氮浸入后,融解时因受热发生伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。

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