




冻存袋注意事项
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。
冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存前一至二日测试是否有antibody之产生。
2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间限制,而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之品质。
DMSO应为***级等级,无菌且无色是直接购买无菌产品,以5~10m1小体积分装,4℃避光保存,勿作多次解冻。
3.冻存细胞数量要足够。无论再怎么小心,冻存袋代理,细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一批的。所以,一开始冻存细胞的数量要足够。一般要达到5× 10^6 /毫升,CS50冻存袋代理,一瓶不够两瓶凑。但是,这个不能一概而论。有些细胞,比如杂交瘤细胞,只需要1-3x 10^6 /毫升

冻存袋使用需要注意?
1、操作冻存袋复苏,全程使用安全防护设备,建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下,请佩戴护目镜或防护面罩。由于夏季室内温度会高于冬季,请格外小心。
2、冻存细胞储存过程中,200-074-401冻存袋代理,冻存袋的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生,冰塞会***两侧的液体温度传递进而产生***的高压力并导致冻存袋受损。

冻存袋方法的改进
自1977年以来,我们应用四级梯度降温冻存法对30余株哺乳动物细胞及2株节肢动物细胞共1000多支安瓶进行了冷冻保存,效果较好,200-074-400冻存袋代理,大部分细胞的活存率在70%以上。在此基础上对8株抗登革4型(DEN一4)病毒杂交瘤细胞400多支安靓进行了冻存。鉴于四级降温冻存法步骤多,需要经过4℃冰箱和一20℃冰箱长达7~8小时的梯度降温,较难适应单工作中细胞冻存的需要。因此,自1982年以来我们摸索了影响细胞冻存的主要因素,确定了杂交瘤细胞冻存的适保护剂浓度(1.2〕,并研制成功细胞冻存简易装置。

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