






激酶、磷酸酶、磷酸化酶的区别?
激酶催化磷酸基团转移反应,RNA连接酶,比如己糖激酶。
磷酸酶催化磷酸基团的水解,与激酶正好相反。
磷酸化酶催化磷酸解反应,比如糖原磷酸化酶,催化糖原生成磷酸葡萄糖。这其实是磷酸解,要是水解就生成葡萄糖了。当然一般习惯上还是说水解。
激酶催化的反应一般也叫磷酸化,这没什么错误,只是和磷酸化酶容易混淆。
T4 RNA连接酶
用途:用RNA 3"末端标记;RNA和RNA分子间连接;寡核苷酸的环化;tRNA修饰;5" RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链;在蛋白质特***点引入非天然氨基酸。
来源:由大肠杆1菌表达,表达***的来源为T4嗜菌体。
活性定义:37℃30分钟内,催化1 nmol 5"-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2,10mM DTT,1mM ATP,10μM 5"-[P]-(A)12-18(10μM in 5"-termini)。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷1酸酯酶。
酶储存溶液:10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,50mM KCl,0.1mM EDTA,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X):500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃),100mM MgCl2,100mM DTT。
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