RNA提取***-友名生物(推荐商家)

从动物***中提取***组DNA

使用研钵进行匀浆时：

① 取1～100 mg的动物***或人***移入冰浴预冷的研钵中，快速用力展研成匀浆。注）下列***请加液氮研磨至粉末状。

A．富含DNA酶的胰脏、脾1脏、胸腺、淋巴等***。

B．富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等***。

C．富含角质蛋白的***或坚硬的***（如骨骼）等。

② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1，温和研磨30秒钟。注）使用上述①-注）的实验材料时，请在加入Solution A及RNase A1后，将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。

③ 收集650 μl研磨好的***匀浆液移至Collection Tube中。如果匀浆体积不足650 μl，请补充Solution A至650 μl，65℃保温5分钟。

使用研磨棒进行匀浆时:

① 取1～100 mg的动物***或人***移入冰浴预冷的Collection Tube 中，用研磨棒快速研磨成糊状。

② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成匀浆。

③ 加入350 μl的Solution A将研磨棒上的匀浆冲入Collection Tube中，充分振荡混合后，65℃保温5分钟。

DNA提取过程中各种***的作用及原理

溶液II-NaOH-SDS液：NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当pH>12或pH<3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。 在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L，加抽提液时，RNA提取***，该系统的pH就高达12.6， 因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。

　　SDS：

　　SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：

　　(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而***细胞膜。

　　(2)解聚细胞中的核蛋白。

　　(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。 但是SDS能***核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中 (用RNase去除RNA时)受到干扰。

核糖核酸（缩写为RNA，即Ribonucleic Acid），存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种，即A（腺piao呤）、G（鸟piao呤）、C（胞***H4N2)、U(尿***H4N2)，其中，U（尿***H4N2）取代了DNA中的T。核糖核酸在体内的作用主要是引导蛋白质的合成。

***一个细胞含RNA约10pg（含DNA约7pg）。与DNA相比，RNA种类繁多，分子量较小，含量变化大。RNA可根据结构和功能的不同分为信使RNA和非编码RNA。非编码RNA分为非编码大RNA和非编码小RNA。非编码大RNA包括核糖体RNA、长链非编码RNA。非编码小RNA包括转移RNA、核酶、小分子RNA等。小分子RNA（20~300nt）包括 miRNA、 SiRNA、 piRNA、scRNA、 snRNA、 snoRNA等，***也有小分子RNA（50~500nt）。