




细胞冻存步骤
(1)将标本编号,并用Marker笔仔细标注于冻存管管盖及管壁上,同时将每管编号、内容物、取材日期记录于登记本上。
(2)将冻存管装入冻存袋,戴上棉线手套和防护面罩,迅速放入液氮罐中30~60秒速冻,至冻存***完全冻住,取出待液氮完全挥发(注意动作轻柔,CS250冻存袋,避免液氮溅洒)。
(3)将经液氮速冻后的***放入-80℃冰箱相应编号盒中,长期保存。
(4)取材完毕后,将剩余新鲜标本浸泡于10%中尔马林液中固定(切记不要拿错病理号),做好和当日冰冻值班医生的交接,避免遗漏。
(5)清洗取材台及取材器具,器具需用消毒液完全浸泡10~15min,清水冲洗后擦干置于干燥处保存备用,取材器具应定期高温消毒。

细胞冻存袋方法
1、消化细胞(同实验二),将细胞悬液收集至离心管中。
2、1000rpm离心10分钟,弃上清液。
3、沉淀加含保护液的培养,计数,调整至5×106/ml左右。
4、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。
5、将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。
6、贴上标签,写明细胞种类,冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。
7、按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟)→冰箱冷冻室(30分钟)→低温冰箱(-30℃ 1小时)→气态氮(30分钟)→液氮。
注意:操作时应小心,以免液氮。液氮定期检查,随时补充,不能挥发干净,CS250冻存袋代理,一般30立升的液氮能用1~1.5月。

细胞冻存复苏方法
1. 细胞实验室进行常规消毒,紫外照射40min以上。
2. 培养液(DMEM)、0.25%胰蛋白酶(Trypsin)恒温水浴箱37°C预热20min,CS250冻存袋报价,备用。
3. 二亚砜(DMSO)在40°C冰箱中冷藏30min,备用。
4. 从液氮保存罐中取出冻存管,立即放入400°C水浴中,快速摇晃,CS250冻存袋多少钱,直至冻存液完全融化。
5. 将细胞悬液移入15ml离心管,缓慢加入4ml培养液,离心(1000r/min,5min)。
6. 用培养液悬液混悬沉淀细胞,调整细胞浓度,方培养箱中培养。
7. 记录复苏日期。

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