腺病毒的结构
腺病毒含13%DNA和87%的蛋白质，病毒体分子量约为175×106。病毒***组为线状双链DNA，大约含35kb～36kb，腺病毒12、18和31型的DNA组成中，G+C mol%***低（48%～49%），腺病毒载体，属于对动物具有高致***性***型。腺病毒1、2、4、5、8等型的G+C mol%较高（61%），致***性反而低或无。这是一种用于人腺病毒分离株的分组的标准，根据其***同源性将人腺病毒分为A～F等6组。
真核细胞同源重组法
1994 年，Graham F建立了在293细胞同源重组产生重组腺病毒的方法。这个方法需要2个质粒：骨架质粒含有腺病毒绝大部分***组序列，但不含有包装信号；穿梭质粒含有ITR、包装信号和目的***克1隆位点，以及两段与骨架质粒有重叠的序列。将目的***克1隆到穿梭质粒，与骨架质粒共转染293细胞，由于这两个质粒的部分序列有重叠，能够在细胞内发生同源重组，***终产生完整的载体***组，并包装出重组病毒颗粒。该方法曾经被广泛使用，推动了腺病毒载体的发展。由于细胞内重组效率低，某些重组事件还可能产生可copy病毒(RCV)，必需经过噬斑纯化才能获得正确的克1隆化的重组病毒，费时费力，正逐渐被其他方法替代。
PEG法
其基本原理是在二价阳离子（Mg2+、Ca2+等）存在的情况下，PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀，从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。
1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶（DHFR）突变***（氨甲1喋呤抗性）的质粒共培养，此***插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤***，在不含激1素的培养基上再生长出植株。同年Omirulleh等用PEG法将外源***导入到了HE89的原生质体中，建立了植株再生的转化体系。
PEG法虽然转化效率较高，但必须以裸1露的原生质体为受体，而且还受到***型的限制。
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