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高i效液相色谱法概述:
高i效液相色谱 (高i效液相色谱)作为一种高i效、快速的分析分离技术,在上个世纪70年代得到迅速发展,是现代分离检测的重要手段。层析法的分离原理是:当溶解于流动相(mobile phase)的各组分通过固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和),其大小、强弱不同,在固定相中的滞留时间也不同,从而先后从固定相中流出。也叫色层法,色谱法。
高i效液相色谱是从经典的液相色谱方法发展而来,它以液体为流动相,并且采用了微粒细粒高i效固定相的柱层析分离技术。它的分离机理与普通的柱色谱一样,但填料更精细,需要高压泵推动,柱效高,分析速度快。在液相色谱中,流动相也参与了组分的分离过程,其组成、比例和 pH值可以灵活调整,分离方式多样。实践中,对不同样品进行分离,主要是通过改变流动相组成来调节样品在色谱柱的保留程度和选择性。
高i效液相色谱技术自上世纪60年代出现以来,由于采用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品快速、高i效、灵敏的分离检测。高i效液相色谱技术的引入,使液相色谱吸收了经典液相色谱的发展经验,大大提高了仪器的自动化水平和分析精度。目前采用微处理器控制的液相色谱系统,不仅自动化程度高,SCIEX毛细管电泳仪***代理,而且可以控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等),同时还可以缩放、叠加得到的色谱图,并对保留的数据和峰高、峰面积进行处理等,为色谱分析工作者提供了一种、全功能的分析工具。
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高i效液相色谱仪是分析实验室中常用的检测仪器之一,应用日益广泛。这种仪器在使用过程中,不可避免地会出现各种问题,SCIEX毛细管电泳仪批发,其检测结果的准确度直接影响仪器正常工作。操作人员若能了解故障的原因,就能清楚预防和排除这些故障的方法,正确使用仪器,使仪器性能达到至大化。下面我们将从以下几个方面与你分享使用高i效液相色谱仪时需要注意的一些问题。
试管的使用问题。
1、试管是否清洁。高i效液相色谱分析是一种灵敏的分析方法,若采用不洁净试管,将会影响检测结果的准确性。举例来说,当用作为溶剂溶解样品时,所用的小试管是用橡胶塞盖的,因此,在每一样样品中,都存在着一定保留时间的干扰峰,经证实,该干扰峰是由浸入橡胶塞而溶下的组分所产生的干扰峰存在。
2、塑料试管的溶解。近几年,一次性塑料试管为试验人员带来了很大的方便。然而,在使用过程中必须注意有机溶i剂对试管的溶解现象,当用这种试管提取样品时,有些有机溶i剂(如等)会溶解在管壁上,SCIEX毛细管电泳仪,这些物质有时也会在检测器上产生信号,从而干扰样品测定。此时,可以先用同样的实验条件测试一下,SCIEX毛细管电泳仪价格,看看提取液是否会在检测器上产生干扰信号,如果确实存在干扰信号,则只需更换耐有机溶i剂玻璃试管。
3、试管壁对样品的吸附问题。此外,还应注意这一问题,否则也会影响检测结果的准确性,在监测(Therapeutic Drug Monitoring, TDM)中,一些被测如、丙咪嗪等易吸附在玻璃试管的管壁上,因此,操作中宜采用聚管,以0.5%的已二胺已烷液作为提取剂,可有效防止吸附。
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