位点特异性重组法
这类方法使用来源于噬菌体的重组酶，这类重组酶能够识别特异性序列位点(长度数十碱基对至数百碱基对)并引发含有该位点的序列之间的重组；在腺病毒骨架和穿梭质粒中添加重组酶能够识别的特异性位点，在细胞内表达对应的噬菌体重组酶或体外使用重组酶，介导骨架质粒和穿梭质粒之间的位点特异性重组，将目的***引入骨架质粒，形成带有重组腺病毒***组的腺病毒质粒；转染包装细胞，进行病毒载体拯救。该方法进一步简化了腺病毒质粒的制备过程，它的缺限是在腺病毒***组的某些部位不可避免的残留了重组酶特异性识别位点。
腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒，在自然界分布广泛，至少存在100种以上的血1清型。其***组长约36kb，两端各有一个反向末端重复区（ITR），ITR内侧为病毒包装信号。***组上分布着4个早期转录元（E1、E2、E3、E4）承担调节功能，以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期***E2产物是晚期***表达的反式因子和copy必须因子，早期***E1A、E1B产物还为E2等早期***表达所必须。因此，E1区的缺失可造成病毒在copy阶段的流1产。E3为copy非必须区，其缺失则可以大大地扩大插入容量。腺病毒载体大多以5型（Ad5）、2型（Ad2）为基础，新增了55型（Ad55），很多研究机构在研究当中，55型将比5型流行以及应用更具广泛性。
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