环境条件
无菌环境：***和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活1体内，解1毒系统和免1疫系统可抵抗微生物或其他***物质的***，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免1疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对***物质的解1毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌***和培养基以及无菌操作。
常见的微生物污染有支原体、***、***。支原体无致死毒性，可与细胞长期共存，细胞增殖检测***盒，对细胞有潜在影响，但体积小，不易鉴别，可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。***增殖快，在短时间内即可大量扩增，并产生毒1素杀1死细胞。***的种类繁多，肉眼可见，漂浮于培养液面上，可呈丝状、管状或树枝状等。
1830年后，随着工业生产的发展，显微镜制作克服了镜头模糊与色差等的缺点，分辨率提高到1微米，显微镜也开始逐渐普及。改进后的显微镜，细胞及其内含物被观察得更为清晰。1839年，德国植物学家施莱登（Matthias Schleiden，1804～1881）从大量植物的观察中得出结论：所有植物都是由细胞构成的。与此同时，德国动物学家施旺做了大量动物细胞的研究工作。当时由于受胡克的影响，对细胞的观察侧重于细胞壁而不是细胞的内含物，因而对无细胞壁的动物细胞的认识就比植物细胞晚得多。施旺进行了大量研究，个描述了动物细胞与植物细胞相似的情况。
细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。
加入10ml DMEM培养基清洗，弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5%CO2的细胞培养箱中培养。
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