质粒提取***盒-友名生物公司(图)

植物ＤＮＡ的ＳＤＳ提取法：1 取2-3ｇ新鲜叶片，在液氮中研磨成粉状(防止溶化)后转入15ｍｌ离心管中。2 加入5ｍｌ于65℃预热的提取缓冲液，65℃水浴保温30ｍｉｎ(摇动数次)，使提取液与样品充分混合。3 加入2ｍｌ5ｍｏｌ/ＬＫＡｃ，剧烈振荡，冰浴保温20ｍｉｎ以上。4 2700×ｇ离心20ｍｉｎ，将上清液倒入新的15ｍｌ离心管中，(若提取ＤＮＡ用于Ｓｏｕｔｈｅｒｎ等实验，质粒提取***盒，一般在转移上清时加滤膜，防止样品残渣混入，可保证ＤＮＡ纯度)。5 加入4ｍｌ氯1仿/异戊1醇(24∶1)，摇匀，平衡，2700×ｇ离心15ｍｉｎ。6 在另一新的15ｍｌ离心管中加入5ｍｌ预冷的异丙1醇，将上清液用移液转入此管，在-20℃冷却30ｍｉｎ以上。7 2700×ｇ离心10ｍｉｎ，弃去上清液，用4ｍｌ70%乙醇洗涤，室温保持10ｍｉｎ。2700×ｇ离心3ｍｉｎ，倒去上清液。8 重复步骤7，用4ｍｌ70%乙醇洗涤，室温保持10ｍｉｎ。2700×ｇ离心3ｍｉｎ，倒去上清液。超净工作台内吹干(3ｈ左右)。9 加1ｍｌＴＥ缓冲液中溶解，加10μｌＲＮａｓｅ(10ｍｇ/ｍｌ)，在37℃恒温箱中温育20ｍｉｎ。10 再加100μｌ3ｍｏｌ/ＬＮａＡｃ和2ｍｌ无水乙醇，2700×ｇ离心3ｍｉｎ，倒去上清液。超净工作台内吹干(3ｈ左右)。11 将ＤＮＡ沉淀溶于150μｌＴＥ中，置于超净工作台内(3ｈ左右)。将ＴＥ溶液转入已灭菌的1 5ｍｌｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，-20℃保存备用。

信使RNA（mRNA）早先发现于1960年，在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成，具有以下特点。 

1.含量低，占细胞总RNA的1%~5%。

2.种类多，可达105种。不同***表达不同的mRNA。

 3.寿命短，不同mRNA指导合成不同的蛋白质，完成使命后即被降解。***mRNA的平均半衰期约为1.5分钟。脊椎动物mRNA的半衰期差异极大，平均约为3小时。

4.长度差异大哺乳动物mRNA长度为5×102~1×105nt原核生物与真核生物的mRNA虽然在结构上有差异，但功能一样，都是指导蛋白质合成的模板。

细胞增殖是生活1细胞的重要生理功能之一，是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。

越来越多的研究者们已经把目光集中到了细胞增殖检测，关于细胞增殖检测的方法也在不断更新。那么到目前为止，研究细胞增殖有哪些手段呢？

细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿1瘤medicine效果的基础实验手段。准确的检测细胞增殖方法是BrdU法。而EdU法检测***盒是Brdu方法的革命性突破。EdU***盒是一种嘧1啶类似物，可以在DNA合成期整合入DNA双链。通过以上原理图的对比，大家不难发现，EdU法检测细胞增殖，无须抗1体，无变性步骤，保持细胞形态和DNA完整性，是一种简单，可靠，省事的创新方法。