无细胞系统是利用细胞提取物（而不是细胞）进行***转录和翻译的系统。一个无细胞***表达系统主要包括三个部分：细胞提取物，反应混合液，以及核酸模板
1.细胞提取物：从细胞中提取的物质，主要包含核糖体、RNA聚合酶、其他转录和翻译蛋白（比如σ因子、起始因子和延伸因子），以及用于能量代谢的酶和辅因子。在有些菌株的提取物中，可能***了蛋白酶和核酸酶的活性。
2.反应混合液：包含蛋白质合成所需的一些原料，如氨基酸、核苷酸、盐离子（如铵盐、镁、钾）、能源（糖类、磷酸肌酸等）、拥挤***（crowding agents）、代谢辅因子（辅酶A、NAD）、缓冲液、tRNA以及其他代谢添加剂等。
3.核酸模板：可以是质粒DNA或PCR产物线装DNA，浓度通常在1-20 nM。
无细胞系统一般的反应体积为10微升，但是根据其实际应用，反应体系可以从10^(-15)到10^3变化。在开始反应时，WB封闭液，将三种组分在16-37℃下孵育，蛋白质合成将在1-24h内进行。
工业应用领域
① 皮革脱毛：酶脱毛（50-55℃， PH7.0-8.0，20—25u/ml）→ 水洗 → 浸酸 →鞣制。
② 胶片回收银：50℃， PH9.5-10.5，用20—23u/ml进行回收。
③丝绸脱胶：预处理 → 脱水 → 酸处理（蛋白酶18—24u/ml，肥皂0.75%， 48—50℃，30—60分钟，PH7—8）→ 脱水 → 扯皮 → 冲洗 → 脱水 → 抖松 → 烘干 → 抖松。
④ 饲料加工的应用：该酶与α—淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、糖化酶等复合使用。可广泛应用于仔猪、育成猪、禽类、鱼类的饲喂，可将酶制剂加入饲料后，人为的控制温度、湿度、PH和作用时间，使物料在酶的作用下得到一定程度的降解。小规模饲养时可将酶制剂直接添加到饲料中，经充分拌和后饲喂畜禽，拌和时应采用逐步扩大的拌和方法，以保证酶在饲料中的均匀分布。通常用量为饲料的0.1—1.0%。
蛋白质分子伴侣（molecular chaperones)是蛋白质合成过程中形成空间结构的控制因子，广泛存在于从***到人的细胞中。分子伴侣新生肽链的折、加工租穿膜进大细胞器的转位过程中起关键作用。它们有些结合在多肽链上防止肽链降解或其侧链非特异聚集；有些则可引导某些肽链正确折叠并集合多条肽链成为较大的结构。
分子伴侣结合并稳定其靶蛋白质的能力具有特异性，并依赖于ATP水解。例如热激蛋白（heat shock protein)就是分子伴侣的一个家族。因加热时可在许多细胞中被诱导出来而得名。热激蛋白源于细胞内源性保护蛋白质。另外，分子伴侣还可以是核酸、磷脂、核糖体及一些小分子物质。
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