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转移RNA

转移RNA（tRNA）在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%，绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在，Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。

tRNA一级结构具有以下特点：

①是一类单链小分子RNA，长73~95nt（共有序列76nt），沉降系数4S。

②是含稀有碱基***多的RNA，含7-15个稀有碱基（占全部碱基的15%~20%），位于非配对区。

③5′末端碱基往往是鸟piao呤。

④3"端是CCA序列，其中的腺苷酸常称为A76，其3’—OH是氨基酸结合位点。

人ELISA***盒的原理及优势：

　　1、ELISA是以immune学反应为基础，将抗原、antibody的特异性反应与酶对底物的有效催化作用相结合起来的一种敏***很高的试验技术。

　　2、由于抗原、antibody的反应在一种固相载体──聚苯乙1烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种***孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。

　　3、Elisa生物试验是一种敏***高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其***稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在immune学检验的各领域中。

　　4、ELISA检测***盒适用于体外定性检测人血1清或血浆中的抗人类HEV病毒Mantibody ELISA检测。

　　5、ELISA的基础是抗原或antibody的固相化及抗原或antibody的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或antibody仍保持其immune学活性，酶标记的抗原或antibody既保留其immune学活性，又保留酶的活性。

棉花等酚类、多糖类物质较多的植物ＤＮＡ提取法：

1 取2ｇ新鲜幼嫩的叶片放入研钵中，胶回收***盒，加入液氮后快速、充分研磨，待成极细的粉末状时迅速转入到50ｍｌ离心管中。

2 在50ｍｌ离心管中加入10ｍｌ冰预冷的提取缓冲液，在涡悬振荡器上充分混匀。

3 于4℃，2700×ｇ离心20分钟，倒去上清液。

4 在沉淀中加入5ｍｌ裂解缓冲液，在涡旋振荡器上充分混匀。

5 于65℃水浴锅中温育30ｍｉｎ。

6 加入5ｍｌ氯1仿/异戊1醇(24/1)，并上下翻转以充分混合。

7 于4℃，2700×ｇ离心5分钟。

8 转移上层水相至一新的50ｍｌ离心管中。

9 重复步骤7-9一次。

10 加入2/3体积的冰预冷的异丙1醇，并上下翻转以充分混合，至-20℃2ｈ。

11 于4℃，1200×ｇ离心10ｍｉｎ。

12 在一新管中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液，用玻棒将ＤＮＡ转入该管(如不能直接用玻棒缠出，可离心后倒出上清，再在其中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液)，放置20ｍｉｎ后稍许离心，移走上清并吸出残存乙醇，室温干燥。

13 加入1 0ｍｌＴＥ(10ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌＰＨ=8 0，1ｍｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ)并加入终浓度为20(ｇ/Ｌ的ＲＮａｓｅＡ，过夜。

14 风干，用50μｌＴＥ缓冲液溶解，存于-20℃备用。