广州正和会展(图)-生物******-******

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i细胞培养污染物关键分成两大类：

有机化学污染物，如培养基、***和水里的残渣、类、增粘剂和除污剂。

生物体污染物，如病菌、菌、酵母菌、病毒、衣原体及其别的细胞系的交叉式污染。

可根据多方面掌握污染源及其选用优良的无菌技术性，******会议，减少污染产生的频次和比较严重水平。******

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交叉式污染的确定

交叉式污染虽比不上微生物污染广泛，但与HELA细胞以及他生长发育快速的细胞系间普遍的交叉式污染是个确立的问题，会导致严重危害。

从信誉好的细胞库获得细胞系、定期维护细胞系特性及选用优良的无菌技术性有利于防止交叉式污染。

根据DNA***图谱、荧光原位杂交和性核素剖析可确定有没有交叉式污染。******

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i细胞换液常见问题

为细胞换液时，******，要顺着培养瓶的一侧轻轻地添加，而不是立即加到细胞中，以防损害细胞，当培养的细胞株比较敏感时特别是在要留意。应用无菌夹层玻璃塑料吸管或一次性一次性吸管和移液器实际操作液态时，每一个塑料吸管只有运用一次，以防交叉式污染。******

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大部分一切正常的哺乳类动物细胞系都能在pH数值7.4的条件中生长发育优良，并且不一样细胞株间差别很小。

可是，现阶段发觉有一些转换细胞系在轻微偏弱酸性的条件中即pH7.0-7.4时生长发育不错，而有一些一切正常的成化学纤维细胞系更合适轻微偏偏碱的自然环境即pH为7.4-7.7。******

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i细胞培养基可操纵培养管理体系的pH值，为培养的细胞缓存pH值的转变。

这类调节作用通常是根据加上有机化学缓存盐（例如：HEPES）或是二氧化碳-碳酸氢盐缓存盐完成。

因为培养基的pH值在于融解态二氧化碳与碳酸氢盐间的高精密均衡，因而空气中二氧化碳成分的变动会更改培养基的pH值。******

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应用二氧化碳-碳酸氢盐缓存盐培养基时务必应用外源二氧化碳，尤其是应用敞开式培养皿培养细胞或是开展浓度较高的的转换细胞系培养时。******

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当细胞呈指数值繁殖，贴壁培养的细胞已占有全部可以用栽培基质、沒有增加室内空间，或飘浮培养的细胞已超出培养栽培基质所支撑点的工作能力，没法进一步生长发育时，细胞繁殖速率将降低乃至终止。为了更好地将细胞相对密度保持在好水准，便于细胞再次生长发育，而且刺激性进一步繁殖，务必对细胞开展传代培养。******

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i细胞培养中应用素的常见问题

细胞培养时不可长期性应用素，由于持续应用素会推动素抗药性细胞株的造成，******论坛，导致轻微污染不断存有。

素只有做为应对污染的终方式短期内应用，生物******，并尽早撤销。

假如长时间应用素，则应与此同时开展无素培养，便于做为辨别隐性的对比。******

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i细胞冻存的重要性

持续培养的细胞系非常容易产生遗传漂变，比较有限细胞系会产生变老，全部培养的细胞都易遭受微生物环境污染，即使运行状况佳的试验室也会碰到设备故障的问题。

因为已创建的细胞系是一种珍贵資源，拆换细胞系成本费昂贵，并且消耗時间，因而，务必将其冷藏起來，长期性储存。******