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低温生物***——***分离方法介绍

孢子分离又可分为以下几种方法：

( 1 ）褶上涂抹法：选取新鲜、健壮、未开伞、未裂破的子实体，洗净后用75 %酒精表面灭菌2 分钟，然后连同培养基一起放入接种箱内，经熏蒸消毒12 ～ 24 小时，再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹，把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种，后置于25 ～ 28 ℃恒温箱内培养，可得纯***。

( 2 ）孢子印采集法：取灭过菌的载玻片、试纸或黑布，置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后，便落下孢子，形成印痕（即孢子印）。然后，用接种环或玻璃棒蘸取孢子，水产养殖***生产厂家，接种在平面或斜面培养基上，进行恒温培养，水产养殖***，可得纯***。

( 3 ）孢子收集器采集法：孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘，直径25 厘米左右，盘内先垫衬4～6 层纱布，***放1 副9 厘米直径的培养皿，大盖口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架，再将带孔的玻璃钟罩盖上，顶上罩孔用棉塞塞好，用纱布包好整个孢子收集器，置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。

孢子收集器灭菌消毒后，水产养殖***报价，放入无菌室或无菌箱内。然后，用小刀割取1 块4～5 厘米大小的子实体，插在收集器内的三角架顶上（若无孢子收集器，也可用培养皿代替）。再置于温度24 ～26 ℃下培养24 小时，培养皿中便可见到白色粉状物，此即为孢子。此时，可将孢子收集器再移至接种箱内，取出培养皿，盖好，并在培养皿内加入10 ～ 20 毫升的无菌水，使孢子散于本中，成为孢子悬浮液。然后，再用无菌打针筒或吸管吸取孢子悬浮液，接种于试管斜面培养基上，每管注2 ～ 3 滴。置于24 ～ 26 ℃温度下培养5 ～ 7 天，培养基上便可长出白色菌落。待菌落直径有0 . 5 厘米时，选健壮的菌落，再移接于另一试管的斜面培养基上培养。当白色菌丝长满试管时，便得纯***。

低温生物***——常用***介绍

枯草芽孢菌

枯草芽孢菌本身不是杀菌剂，但是它的生长繁殖能起到杀菌的作用，可用于植物表面喷雾，可灌根，可底施，建议混合有机肥或腐植酸肥做底肥使用，也可以说他是微生物杀菌剂，更有一定的土壤调理功能，如果植株喷施，建议和含腐植酸叶面肥混合一起喷雾，防治的病害较为广泛，不过只是预防，效果不是特别理想，它主要通过营养竞争进行生长繁殖从而占据生存空间的方式来阻止植物病原菌的生长，能在植物表面迅速形成一层高密保护膜，使病原菌得不到生存空间，从而保护作物免受病原菌危害。同时，枯草芽孢菌可分泌抑菌物质，***病菌孢子萌发和菌丝生长，从而达到预防的目的.对环境友善，对农作物具有一定的刺激生长的作用，可以促进增产增效。

低温生物处理的优势

我国北方污水处理一直受到低温影响，尤其氨氮处理效果差、出水难以达标等问题的困扰。目前污水厂一般采用增加污泥浓度、水力停留时间、池体保温加盖等措施以提高处理效果，但***和运行费用增加的问题也随之而来。温度降低所导致的生物处理效果下降，归根结底是由于当水温低于15℃时，处生化系统中存在的低温微生物的数量和活性不能达到常温下中温菌的水平，水产养殖***种类，污水中的有机污染物质不能被迅速降解所导致的。因此，采用投加耐低温生物菌剂的方式对东北地区污水处理厂生化处理系统的耐低温改良，对低温快速启动和污水处理厂污水稳定达标排放意义重大。